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- 產(chǎn)品名稱： Rac Activation Assay Kit
- 產(chǎn)品貨號： 80501
- 貨期： 現(xiàn)貨
- 價格與訂購： 6800
- 數(shù)量：
庫存： 5
- 規(guī)格： 96T
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
產(chǎn)品說明
小 G 蛋白是從屬于細胞調節(jié)因子中的一個超家族。Rho 家族是小 G 蛋白中的一個亞家族，它在細胞運動、細胞分裂以及基因轉錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的 RhoA 就屬于Rho 亞家族中的一種， RhoA 參與生理活動過程中其分子結構會呈現(xiàn)出 2 種相互轉換的形式：與 GTP 結合的激活狀態(tài)和與 GDP 結合的非活性狀態(tài)。
目前RhoA蛋白活性的檢測主要是依據(jù)小GTP酶RhoA可以與RhoA效應蛋白(Rhotekin)的 RBD 區(qū)域結合，使 RhoA 效應蛋白活化從而發(fā)揮生物學功能，進而間接的進行 RhoA 活性功能的監(jiān)測。然而此方法在檢測過程中存在著一定的局限性比如 GTP 水解成 GDP 的速度過快以及 RhoA-GTP 結合蛋白與 RBD 結合區(qū)域之間較低的親和力，導致這種檢測方法的重復性較差。
RhoA 活性檢測試劑盒主要是依據(jù)單克隆抗體能夠特異性的識別特殊構象的 RhoA-GTP 結合蛋白，而不識別 RhoA-GDP 結合蛋白，進而簡單并且快速的進行 RhoA 的活性檢測。同時試劑盒中的 RhoA-GTP 單克隆抗體也可以進行免疫組化實驗中細胞和組織中 RhoA 的活性監(jiān)測。每套試劑盒可以進行 20 次檢測。檢測原理
RhoA 活性檢測試劑盒主要是利用識別蛋白特異構象的 RhoA-GTP 單克隆抗體特異性的去檢測細胞提取物或者體外的（樣品需要進行 GTPγS 活化處理）活性 RhoA-GTP 的水平。簡言之，特異性識別 RhoA 活化構象的鼠單克隆抗體可以特異性結合細胞裂解液中的 RhoA-GTP 活性蛋白，然后利用 protein A/G 將抗原抗體的結合物吸附下來，再利用特異性識別 RhoA 活化構象的兔多克隆抗體進行免疫印跡分析進行檢測。
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試劑盒成分
1. 特異性識別 RhoA 活性構象的鼠單克隆抗體（Anti active RhoA, Mouse Monoclonal Antibody (Catalog No. 26904)）：小管裝--30ul (抗體濃度是 1mg/ml)，抗體溶于 PBS（pH7.4）并包含 50%的甘油和 0.05%的疊氮化鈉。此抗體可以特異性識別所有脊椎動物中的 RhoA-GTP。
2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管裝—400ul 包含 200ul Protein A/G agarose和 200ul 20%乙醇溶液。（使用時溶液需要充分混勻，再吸取）
3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶裝—30mL 包含 250 mMTris-HCl (pH8.0),750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
4. 特異性識別 RhoA 活性構象的兔多克隆抗體（Anti RhoA, Rabbit Polyclonal Antibody
(Catalog No.21009)）：小管裝--30ul (抗體濃度是 1mg/ml)，抗體溶于 PBS（pH 7.4包含有 50%的甘油。
5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管裝—100ul (10 mM) ，實驗中 0.5mL 細胞裂解液使用 5ul GTPγS 標記。
6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管裝—100ul (100 mM) ，實驗中 0.5mL 細胞裂解液使用 5ul GDP 標記。
儲存條件
試劑盒的成分在試劑盒的有效期限內(nèi)必須存放于 4°C 條件下保存。
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Storage
Store all kit components at 4oC until their expiration dates.
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Note
For Research Use Only.
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